抗体是广泛研究和体外诊断 (IVD) 应用的核心试剂。根据生产方法，它们可以分为多克隆或单克隆，或者根据它们识别的靶标类型分为主要或次要试剂。选择抗体时要考虑的因素包括其验证的严格程度以及它们是否有足够的数量来满足特定项目的长期需求。

什么是多克隆抗体和单克隆抗体？

已建立的抗体生产方法是通过用感兴趣的蛋白质对动物进行免疫来启动的。然后由抗原呈递细胞处理，以便能够通过循环 B 淋巴细胞进行检测，每个 B 淋巴细胞在其表面表达不一样的抗体。目标识别后，B 淋巴细胞进行克隆扩增并分泌可从血清中纯化的抗体。以这种方式产生的抗体被描述为多克隆的，因为所得产物包含来自多个B淋巴细胞的抗体，每个B淋巴细胞识别不同的表位。

作为该方法的替代方法，可以分离 B 淋巴细胞并用于产生杂交瘤。通过在适当的培养基中稀释它们，使得多孔板的每个孔仅接收一个杂交瘤，可以测试细胞上清液并鉴定表现很好的克隆。通过这种方法产生的抗体被描述为单克隆抗体，因为最终产品中的每种抗体都是相同的。多克隆抗体的优点是，由于表位冗余，它们可以提供信号放大，而单克隆抗体则受益于高特异性、一致的性能和有保证的长期供应。

什么是一抗和二抗？

一抗直接与特定抗原（例如细胞骨架蛋白或细胞因子）结合，而二抗则用于间接检测。这意味着只有当一抗识别出它们的靶标时，它们才会与一抗结合。二抗是通过使用其他物种的抗体对动物进行免疫接种来产生的，并且通常用于通过多个二抗与每个一抗的结合来提供信号放大。

抗体选择的注意事项

选择抗体时需要考虑的因素包括是使用多克隆还是单克隆、是否需要直接或间接检测以及将采用什么类型的读数。虽然辣根过氧化物酶 (HRP) 等酶通常用于比色或化学发光检测，但荧光团更适合流式细胞术或免疫组织化学 (IHC) 等多重应用。至关重要的是，应该证明抗体试剂能够特异性识别其目标抗原，而不会表现出不需要的交叉反应。

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